Laboratorij za nematode

UPUTE ZA UZIMANJE PROSJEČNOG UZORKA TLA ZA ISPITIVANJA NA PRISUTNOST NEMATODA

 

SVRHA ISPITIVANJA

 

Tlo predstavlja osnovnu životnu sredinu nematoda. Upravo kroz tlo velik broj vrsta nematoda napada kulturne biljke, uzrokujući nematozna oboljenja ili oštećenja biljaka. Stoga radi utvrđivanja prisutnosti i brojnosti nematoda prikupljaju se i obrađuju uzorci tla. Ne treba izgubiti iz vida i činjenicu da se nematode prenose i šire i na druge načine (voda, oruđe, strojevi, transportna sredstva, ambalaža), čemu treba prilagoditi metodiku otkrivanja ove grupe štetnih organizama.

Slika 1. Oštećenja na luku                                     Slika 2. Oštećenja na mrkvi

 

UZORAK TLA

Utvrđivanje postojanja i brojnosti nematoda vrši se prikupljanjem te obrađivanjem uzoraka zemljišta.

Uzorci tla nisu težinski (zapreminski) ograničeni. S obzirom na potrebe ispitivanja, težina odnosno zapremina uzorka zemljišta najčešće se kreće od 100 do 1.000 grama (mililitara). Naime, za neke vrste (npr. Meloidogyne sp., Heterodera sp. i dr.) dovoljno je svega nekoliko grama zemlje da bi se utvrdila njihova prisutnost i posljedice u biljnoj proizvodnji, dok je za druge vrste (npr. Ditylenchus dipsaci) neophodno uzeti veći uzorak.

 

PROSJEČAN UZORAK TLA

Za obvezno ispitivanje postojanja karantenskih i ekonomski štetnih vrsta nematoda na objektima za proizvodnju sadnog materijala i sjemena, preporuka je da se prije uzimanja uzorka parcela skicira i podijeli na manje dijelove. Parcela veličine 1 ha podijeli se na 8 ili 16 parcela (da bi se utvrdila žarišta) veličine 1250 m² ili 625 m² , čime se odredi broj uzoraka koji će se uzeti (8 ili 16) po hektaru. Ako je preostali dio parcele manji, odnosno nešto veći od 1250 m² ili 625 m² , onda se sa toga dijela uzima poseban uzorak. Isto tako se poseban uzorak uzima sa parcele koja je manja od 1250 m² odnosno 625 m².

Na skici se parcele obilježavaju rimskim brojevima. Uzorci sa parcele se obično obilježavaju slovima ili arapskim brojevima. Oznake sa skice moraju se u cijelosti poklapati sa oznakom uzorka u vrećici.

Slika 3. Različiti obrasci za uzimanje uzoraka:

 

Obrasci za uzimanja uzoraka mogu biti nesistematični (a) ili sistematični (b-d).

Sistemsko uzimanje uzoraka je strukturiraniji način za uzimanje uzorka, pošto uzima u obzir prirodu polja i distribuciju nematoda.

Nesistematično uzimanje uzoraka je reprezentativno samo ako je područje uzimanja uzoraka maleno.

 

KAKO SE VRŠI UZORKOVANJE

Uzimanje uzoraka započinje od vanjske ivice ugla prve parcele, na način da osoba koja uzima uzorke drži u jednoj ruci otvorenu vrećicu za uzorkovanje, a u drugoj lopaticu za zahvatanje zemlje. Prvo uzimanje je na mjestu gdje stoji, a naredno na svakih 6 metara krećući se cik-cak linijom do suprotne ivice parcele. Na toj strani parcele uzorkovač se pomjeri za oko 6 m i u blagom cik-cak kretanju vraća se prema polaznoj strani uzimajući uzorke na svakih 6 m sljedećeg dijela parcele. Opisani način kretanja i uzimanje uzoraka odnosi se na slučaj da se uzima 8 uzoraka po ha.

Za prikupljanje 16 uzoraka sa jednog ha  kretanje je isto, s tim da se dio zemlje uzima na svaka 4 metra. Ukoliko se sa jednog hektara uzima manji broj uzoraka (rutinska analiza), uzorkovač povećava razmak zahvatanja vodeći računa da se jedan uzorak dobije sa najmanje 50 zahvata zemlje, prilikom čega se uzme 750-1000 gr (ml) zemlje što predstavlja jedan prosječan uzorak tog hektara.

 

GDJE SE UZIMA UZORAK

Uzorci tla uzimaju se obavezno na:

- objektima i usjevima na kojima će se proizvoditi sadni materijal ili vrste sjemenskog materijala; (što je regulirano Zakonskim propisima);

- na proizvodnim površinama sa lošim proizvodnim efektom

- po potrebi i na drugim površinama koje se koriste za uzgoj biljaka.

 

 

VRIJEME UZIMANJA UZORAKA

Kretanje kroz tlo i životni ciklus populacije mnogih vrsta nematoda sezonski variraju. Stoga kod uzimanja uzoraka treba voditi računa o optimalnom vremenu uzimanja, učestalosti i broju zahvata, mjestu i dubini sloja zemljišta itd., a sve to treba prilagoditi ispitivanoj vrsti ili grupi nematoda.

Optimalno vrijeme za uzimanje uzoraka varira između vrste usjeva (kultura), a povezan je sa stadijem rasta usjeva i ciljem uzimanja uzorka (dijagnostičko ili preventivno). Preventivno uzimanje uzoraka obavlja se rano u sezoni, prije sadnje ili na kraju sezone kako bi se utvrdio broj nematoda (gustoća).

 

Ne treba zaboraviti:

- nematode kao pokretljivi živući organizam, većinom se kreću ne više od
metar kroz tlo unutar njihovog života. Međutim, nematode se mogu brzo širi od polja do  polja preko opreme, pa čak i blatnim cipelama kontaminiranim  nematodama. Voda tijekom poplava i navodnjavanja također može rasturiti nematode na druga polja. Isto tako njihovo kretanje je omogućeno zaraženim biljkama, sjemenkama, i lukovicama  i sl.

- za neke vrste nematoda vrijedi da se njihova prisutnost može utvrditi tijekom cijele godine bez obzira na dubinu do kojeg dopire korijenov sistem biljaka

-  u našim klimatskim uvjetima tijekom ljetnih mjeseci gornji sloj zemljišta (0-5 cm, a ponekad i dublje) se isuši tijekom ljetnih mjeseci, što ima za posljedicu uginuće ili smanjenje broja grupe slobodno živućih nematoda.

- neke vrste npr. iz grupe cistolikih nematoda na zaraženom polju mogu se naći tijekom cijele godine, bilo u stadiju cista ili infektivnom ili rezistentnom stadiju.

 

Slika 4. Simptom na korijenu vinove loze                           Slika 5. Izgled nadzemnog

uzrokovane vrstom Meloidogyne sp.,                                 dijela trsa kao posljedica

                                                                                        prisutnosti X.index na korijenu

                   

Slika 6. Apikalne gale inducirane sa:

      

6a. Phylloxerom                                            6b. Xiphinemom indeks